. Analyse
histologique et immunohistochimique
. Réalisation d’un équivalent dermique
. Epidermisation des équivalents
. Etude de la différenciation des kératinocytes
. Expression des résultats
III. La reconstitution in vitro d’équivalents de peau
- de la prolifération épithéliale
- de la différenciation épithéliale
Exemple : évaluation d’un produit ou de dispositifs émettant des rayonnements lumineux à visée cicatrisante
- Réalisation d’un équivalent dermique en mélangeant du collagène de type I et des fibroblastes : formation d'une lattice par condensation du collagène dans une étuve à 37°C.
- Epidermisation des équivalents par implantation d'un fragment d’épiderme.
Epidermisation
Epidermisation des équivalents par implantation d'un fragment d’épiderme.
- Changements des milieux de culture 2 fois/semaine pendant 2 semaines avec différents facteurs favorisant la croissance épidermique (EGF, hydrocortisone).
- Etude de la différenciation des kératinocytes dans un équivalent de peau reconstituée in vitro :
- inclusion en paraffine pour études histologiques standards
- congélation pour révélation des cytokératines par immunomarquage
- fixation pour étude ultrastructurale en microscopie électronique. - Expression des résultats :
- Photographies au microscope optique et électronique.
- Etablissement de scores semi-quantitatifs des immunomarquages de cytokératines
Expression des résultats
Etablissement de scores semi-quantitatifs des immunomarquages de cytokératines
Mise à jour : 03/12/2010
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