III-1. Analyse immunohistochimique et histologique
But
Evaluation d’un produit à visée cicatrisante par analyse de la différenciation des kératinocytes dans un équivalent de peau reconstituée in vitro
Reconstitution in vitro d’équivalents de peau
Réalisation d’un équivalent dermique en mélangeant du collagène de type I et des fibroblastes : formation d'une lattice par condensation du collagène dans une étuve à 37°C.
Epidermisation des équivalents par implantation d'un fragment d’épiderme.
Changements des milieux de culture 2 fois/semaine pendant 2 semaines avec différents facteurs favorisant la croissance épidermique (EGF, hydrocortisone).
Inclusion en paraffine pour études histologiques standards
Congélation pour révélation des cytokératines par immunomarquage
Fixation pour étude ultrastructurale en microscopie électronique.
Expression des résultats :
Analyse de la prolifération et de la différenciation épithéliale
Photographies au microscope optique et électronique
Etablissement de scores semi-quantitatifs des immunomarquages de cytokératines
Analyse immunohistochimique et histologique
Implantation d'un fragment d’épiderme.
Etablissement de scores semi-quantitatifs des immunomarquages de cytokératines
